本试验测定了补充叶酸是否通过提高甲基再生影响泌乳性能以及补充维生素B12是否可能影响甲基代谢途径。在这个假设中，添加蛋氨酸——形成甲基的一个主要来源，可能会降低对这些维生素的需要量。60头经产荷斯坦奶牛按照产奶量随机分为10组，每组6头。每组奶牛中3头饲喂添加1.83%蛋氨酸作为可代谢蛋白的日粮；另外3头奶牛饲喂相同日粮，其中补加18g过瘤胃保护蛋氨酸（RPM），使添加的蛋氨酸达到可代谢蛋白的2.23%。从怀孕前3周开始到犊牛出生后16周为止，添加相同水平蛋氨酸的奶牛或不补充维生素或者每周肌肉注射160mg叶酸或者注射160mg叶酸+10mg维生素B12。产犊前后奶牛的干物质摄入量没有变化，分别为13.4±0.4kg/d和21.8±0.4kg/d。产奶量没有受到RPM添加的影响。在泌乳16周时，叶酸和维生素B12同时补充有提高产奶量的趋势。这种影响在泌乳期前4周更加显著，不补加维生素、单独补加叶酸和补加叶酸+维生素B12的奶牛产奶量分别为37.5kg/d，37.7kg/d和40.3±0.9kg/d。处理间乳脂率没有变化。在早期泌乳时补加叶酸+维生素B12，乳糖、粗蛋白和总乳固形物增加，但是这种影响会随着泌乳期逐渐减弱。肌肉单独注射叶酸和叶酸+维生素B12有降低血浆中同型半胱氨酸的趋势，从不添加维生素的5.51μM分别降到4.54μM和4.77±0.37μM。本试验结果表明，补充叶酸+维生素B12对奶牛泌乳性能的影响不是由于甲基的增加，作为甲基来源的RPM的添加不能改变奶牛对维生素的感应性。